Hola Compañeros y Colegas!

Luego de 1 año intenso de estudios, se cumple el plazo de 3 semestres de investigación sub graduada. Han sido 3 semestres difíciles pero bien maravillosos en términos educativos y en lo personal, ya que me he enriquecido de experiencias científicas y he ganado muchas amistades. He cumplido muchos de mis objetivos, otros no, han surgido unos nuevos, etc…así es que funciona un laboratorio de investigación. A pesar de que trabajé los 3 semestres en el mismo proyecto, no me arrepiento porque se aprende a trabajar duro y cogerle cariño al trabajo que uno hace.

Bueno…hablemos de ciencia. Sigo en el laboratorio de la Dra. Elsie Parés y continuo laboreando en mi proyecto titulado: Expresión y Caracterización de la proteína FAP1. Ya he posteado todo las técnicas que he aprendido y utilizado. A continuación mi ultimo resumen o abstract de mi trabajo para que tengan una idea de cómo voy finalizando.

Las células de la levadura Saccharomyces cerevisiae expresan la proteína FAP1, la cual es homóloga al factor de transcripción humano NF-X1.  Ambas proteínas contienen regiones de enlace al DNA llamadas dedos de cinc, con las cuales pueden regular la expresión de otros genes.  En estudios iniciales, bacterias electrocompetentes de la cepa BL-21 fueron transformadas con los vectores recombinados pGEM:FAP1(IF) y pGEM:FAP1(Rev), y también con los vectores originales pGEM y pBluescript (KS).  La inducción de los genes fap1 y/o lac-z fue mediante la ayuda del agente IPTG.  En ese entonces, las bandas de proteínas no pudieron ser vistas por SDS-PAGE debido a problemas con la preparación del extracto proteico crudo.  En este semestre, extractos proteicos crudos fueron preparados con la ayuda de un procedimiento desnaturalizante y otro no-desnaturalizante.  Los resultados obtenidos de SDS-PAGE mostraron que tanto los extractos proteicos crudos de las bacterias transformadas con pGEM:FAP1(IF) como con pGEM:FAP1(Rev) no contienen la proteína FAP1 expresada.  Sin embargo, sí se pudo observar que ambas técnicas (desnaturalizante y no-desnaturalizante) son bastante eficientes como para obtener extractos proteicos crudos en muy buen estado.  En un intento por confirmar que la activación del gen fap1 no estuviese comprometida, bacterias de la cepa BL-21 fueron también transformadas con el plasmidio recombinado pBKS 544/483.  Al igual que con los cultivos bacteriales anteriores, la expresión del gen lac-z fue monitoreada después de añadir el sustrato para la enzima ß-galactosidasa llamado X-gal.  Luego de una hora de reacción, el cultivo bacterial que contenía las bacterias transformadas con pBKS 544/483 mostró la ausencia característica del color azul en el medio como resultado de la inactivación del gen lac-z, mientras que los cultivos bacteriales con los plasmidios originales llegaron a mostrar el color azul como resultado de la activación eficiente del gen lac-z por la acción de IPTG.

Ahora entraré en las evaluaciones de los 3 afiches o “posters” que pude ver en el BioMinds Poster Day. Empezaré con el de la estudiante subgraduada del Recinto de Rio Piedras en la categoría de Biología Molecular, Andrea Rivera. Su proyecto se titular: Undertstanding The Role of Phosphorylation in the Nonsense-Mediated mRNA Decay (NMD) Pathway. Trataba sobre como la ruta o pathway de NMD funcionaba en reconocer y degradar  los “mRNA harboring prmature termination codons (PTC), los cuales pueden causar enfermedades genéticas y cáncer. La estudiante me explico sus experimentos y resultados acerca de cómo Upf2p se fosforila y de cómo esto es crucial en la actividad de NMD. Me gustó como ella manejaba esta información, ya que es un tema bien difícil y ella es estudiante de segundo año, o sea que desde prepa esta trabajando, lo cual se lo amerito mucho. Otro punto es que trabajo con una proteína de levadura al igual que hago yo. Su trabajo también tiene aplicaciones futuras en el campo de la medicina, lo cual es muy importante. Ella me contestó todas mis preguntas de forma muy segura y organizada y mostrando siempre un interés genial. En relación al poster lo noté bien organizado y completo. ¡Éxito Andrea!

El segundo poster que evalué fue el de la estudiante V. Román del Recinto de Humacao. Su categoría fue Microbiología y su proyecto se titula: The Effect of Wastewater Influx in the Nutrient Composition  and Abundance of Antoxygenic Photothrophs in Tropical Dairy Wastewater Lagoons. De su trabajo me llamó la atención que ella hizo trabajo de campo, uno de los roles de un buen biólogo. Y también me conto que su tema surgió de una simple pregunta: ¿Por qué el agua se torna color roja? Resumiendo su trabajo trata sobre comparar el efecto de las aguas de desperdicios diarias en granjas en las lagunas de oxidación y en la composición de los nutrientes y la abundancia de bacterias fotótrofas anoxigenicas. Básicamente lo que hicieron fue recopilar muestras de aguas de esas lagunas y analizarlas para determinar los nutrientes y pigmentos. La estudiante me explico todo el proceso y se noto que fue uno arduo pero interesante, el cual ella aprendió a su totalidad. Actualmente están en el proceso de aislar la bacteria responsable de que el agua se torne roja y de identificarla. Su poster fue uno bien sencillo pero que te explicaba todo bien detalladamente. V. Román de tercer año logró cautivar mi interés, ya que estuve más de 10 minutos en su poster y entendí su aplicación tan importante dentro de las industrias pecuarias de nuestro país. Felicidades y sigue hacia adelante.

El tercer afiche que evalue fue el de la estudiante Adriana O. Díaz. Ella es del recinto de Cayey su trabajo cae en la categoría de Microbiología. Potential Protein-Protein Interaction Motifs in Envelope Glycoprotein of Dengue Virus and other Flavirus, fue su tema. Como todos sabemos el dengue es un virus de hebra sencilla de RNA perteneciente a la familia de los Flavirus. Este virus es bien común en PR y es sumamente peligroso. Su interacción con las células dendríticas es mediante un receptor en la membrana de las células y su “envelope protein”. Fue así que ella y su equipo trabajaron en identificar esos motifs para entender la patofisiología del virus. Este trabajo fue bien peculiar porque ella me explicó muy bien como se hacía eso. Buscaron las secuencias de las proteínas y mediante un programa de computadora, el cual estaban aprendiendo a utilizar,  lograron identificar la estructura 3D de esas interacciones proteína-proteína. Me gustó mucho porque a pesar de ser estudios teóricos, se demostró muy bien que tienen data para seguir con su trabajo. La estudiante no fue la excepción, ya que también entendí todo muy bien gracias a sus explicaciones. Su poster fue uno bien llamativo y bonito por todas sus imágenes que explicaban todo muy bien. ¡Éxito!

Para concluir me gustaría decir que las 3 estudiantes hicieron un trabajo extraordinario en todos los aspectos. Además me gustó poder dialogar y compartir conocimientos científicos con estudiantes de otros recintos. Les deseo a todos mucho éxito y suerte en sus trabajos y a los que se gradúan como yo……apenas estamos empezando….mucho ÉXITO! Felices vacaciones y cualquier cosita me pueden escribir en confianza. Nuevamente gracias a BioMinds por su gran ayuda y hasta luego…

Att.

Luis J. Bello Class

2da entrada…

February 27, 2009

¡Hola BioCompañeros!

 

Muchos saludos de mi parte. A continuación les coloco mi abstract.

 

Saccharomyces cerevisiae expresses FAP1 protein during cell cycling progress.  This protein has a human homologue called NF-X1, identified as a transcription factor involved in the regulation of MHC-Class II genes. NF-X1 limit inflammatory responses by negatively regulating the transcription of these genes. FAP1 is localized in the cytoplasm but, upon rapamycin treatment, translocates to the nucleus. These findings therefore suggest a nuclear role for this novel FKBP12 ligand, possibly as a transcription factor. Also, based on their amino acid sequence, both proteins contain a DNA-binding domain called the zinc finger.  This domain is required for many eukaryotic proteins in order to bind DNA for the expression of certain genes.   In this research project, a FAP1:pGEM construct was used for transformation of electrocompetent BL-21 cells and plasmid Bluescript as a control.  Transformants were first grown in LB media containing ampicillin at 37°C until reach an OD600 of 0.5.  IPTG was later added for a final concentration of 100µg/mL to induce the expression of corresponding proteins for 4 hours.  The bacterial culture was harvested before the preparation of crude extracts. After the crude extracts were prepared, the total protein concentration was determinate by a BCA protein assay and read using a spectrophotometer.  The expression of FAP1 and b-galactosidase was monitored with SDS-PAGE. The proteins bans were visualized by Silver Staining and Coomasie Blue   However, since both proteins co-migrate on the same gel and the observed protein bands were very weak, we are now working on a protocol for the preparation of stable protein extracts.  This presentation will include the new methodology proposed by (S. Otnan. 1996) with minor modifications. This work was supported by Bio-MINDS Program sponsored by The Amgen Foundation.

 

Desde el mes pasado, el progreso que he conseguido en base a mis metas es un 4 (mucho progreso, he logrado al menos 80% de los objetivos). Hemos avanzado bastante. Lo único que me falta es esperar unos materiales y proseguir con mis experimentos a ver si puedo lograr el objetivo principal de mi trabajo (expresar a FAP1). Básicamente las dificultades han sido esperar mis materiales. Mientras tanto sigo leyendo más literatura y haciendo unos ensayos para usarlos como control. Estoy transformando Bl-21 Cells con pBKS para expresar Beta-galactosidasa y ver si este método me ayudará con mi proteína. Sigo motivado y confiado en nuestro trabajo. Espero que todos tengan mucho éxito y los veré en la presentación. Cuídense…

Recta Final…

February 3, 2009


Hola BioPartners!

Antes que todo, ¡Feliz Año Nuevo 2009! Que este año y semestre sea uno lleno de bendiciones y éxito para tod@s. Hablemos de ciencia. Este nuevo año será uno lleno de muchos retos.  El semestre pasado fue uno de contratiempos pero a pesar de todo hicimos el máximo. Todavía no hemos cumplido la meta principal del Proyecto FAP1 pero hemos desarrollado nuevas interrogantes y con éstas nuevos propósitos. Como recordarán mi propósito principal es expresar el gen fap1 y obtener su proteína. Todavía ese es el objetivo que se quiere cumplir. Ya que los métodos anteriores no han sido de mucha ayuda, buscamos nuevas alternativas. Este semestre seguiremos trabajando en la parte de la extracción proteica para poder identificar la proteína y ver sí la expresamos. Así que este semestre en vez de seguir experimentando, me he sentado a hacer un poco de bioinformatica y búsqueda de literatura para reforzar mis conocimientos y buscar mas ideas. Mi propósito primordial este semestre es construir un protocolo ideal para la extracción proteica que me sea útil, económico y rápido. En estos momentos sigo instruyéndome en literatura. Estoy haciendo uso principalmente de todos los recursos de la biblioteca del recinto y hasta ahora ha sido de gran ayuda. Este nuevo semestre junto con mi profesora plantamos unas nuevas ideas y metas. Así que para mayo 2009 esperamos haber:

a- Diseñado un protocolo ideal de Extracción Proteica
b- Probar ese protocolo y demostrar que es conveniente
c- Continuar con los propósitos anteriores
d-Presentar un poster bien hecho
e-Terminar el semestre con la satisfacción de que contribuimos a la ciencia.

El trabajo de este semestre será un poco más teórico que practico ya que hay que determinar bien los problemas que nos interfieren antes de proseguir. Esto no significa que no seguiremos con las practicas moleculares, solo que esperaremos. Por ahora no tengo en mente ninguna técnica nueva pero cuando implementemos una se los dejo saber. Bueno no ha sido fácil pero ha sido gratificante aprender y derribar obstáculos. No duden en preguntarme cualquier duda. Nuevamente les deseo el mayor de los éxitos y un año lleno de bendiciones. Hasta luego…

Luis

Diciembre 2008

December 4, 2008

Hola Compañeros!

¡Feliz día de Acción de Gracias y Feliz Navidad! Hablemos de Ciencia…Este semestre ha sido uno de muchos contratiempos y obstáculos, pero de eso se trata esto. Luego de examinar mis resultados de mayo 2008 y proponer mis objetivos a principios de agosto pasado, he cumplido con algunos de esos objetivos, sin embargo no hemos avanzado mucho en el proyecto como tal. Bueno en el ultimo post que hice me quedé en que había transformado mis BL-21 cells electrocompetentes con pGEM (vector muy bueno para clonación). Recientemente volví a transformas las mismas bacterias con PGEM y las crecí en un plato con Agar, ampicilina mas IPTG y X-Gal. Esto me ayudo a ver el crecimiento y crecieron color azul, debido a la inducción del gen lacZ y la metabolización de X-Gal. Luego de ser positivo el crecimiento, se tomó una colonia azul y se inoculo en medio liquido LB + Amp y se incubo a 37°C. Luego se ser positivo el crecimiento se inocularon 2mL de ese cultivo en un Erlenmeyer con 50mL de LB + Amp y otros 2mL en otro Erlenmeyer con 50mL de LB + Amp. Se incubaron los frascos con agitación a 37°C hasta conseguir un OD ~ 0.6. Luego a uno de ellos se le añadió 2mL de IPTG y al otro 2mL de H2O (control). Luego de esperar unas horas de crecimiento se detuvo el crecimiento en hielo. Es aquí donde se hizo el extracto bacterial crudo siguiendo unos protocolos. Al final se guardaron las alícuotas de 0.5mL en el congelador -80°C. Luego se hizo un ensayo de BCA para determinar la concentración de proteína total y se corrió una SDS-PAGE para ver esas bandas de β-Galactosidasa, ya que esta es la proteína que quiero expresar para así usarla de control y a la misma vez aprendo bien el proceso y puedo ver con cuanta cantidad de proteína total puedo ver a FAP1 cuando continúe con mi proyecto en enero 2009. Además esto me ayuda a ver si mi vector esta en optimas condiciones y si es el adecuado para continuar con el proyecto. En conclusión aunque nos atrasamos, vamos bien y eso es lo importante. Para enero quiero continuar con mi proyecto. Una vez logre expresar la banda de β-Galactosidasa, seguiré con el mismo protocolo pero para las muestras que tengo de pGEM:FAP1 y así poder expresar la proteína de interés, FAP1. Gracias a mi mentora y gracias a BioMinds. Hasta la próxima y que tengan unas lindas vacaciones……

Progreso….

October 31, 2008

Hola Bio-Compañeros!

Espero que estén muy bien y esos proyectos estén corriendo al máximo. Bueno…después de todos los inconvenientes académicos y del clima, no hemos tenido mucho tiempo en el laboratorio. En base a todos los propósitos y metas establecidos en agosto 2008 por mi mentora y yo, no hemos tenido mucho avance por lo antes mencionado y por problemas experimentales. Hemos tenido como un progreso intermedio, o sea un hemos cumplido un 50% de los objetivos establecidos hace meses.

Los resultados que te obtenido no son muchos, ya que hemos confrontado dificultades. Al principio de agosto 2008 continúe los propósitos que dejé en mayo 2008, pero hemos decidido que tenemos que empezar todo. Luego de hacer mi SDS_PAGE varias veces para confirmar si había expresado el gen de la proteína FAP1, no se obtuvo ninguna banda, por lo que concluimos que se degradaron las muestras, por lo que empezaré mis ensayos nuevamente. Esta vez ya tendré toda la experiencia y se avanzará más. Actualmente transforme células BL-21 electrocompetente para expresar el vector pGEM y así poder aislarlo para ver si estaba bien. Luego lo purifiqué y corrí una gel horizontal de agarosa y obtuve las bandas del vector. Ahora continuaré con los ensayos previos para repetir todo y expresar el gen fap1. No he contribuido nada significante a la ciencia, pero he enriquecido mis conocimientos grandemente y pronto podremos obtener resultados excelentes. Hasta la próxima chik@s. Éxito en sus proyectos.

Técnica de Lab

September 26, 2008

Hola  Tod@S!

A casi 2 meses de clase he aprendido par de cosas. Una de las técnicas que he aprendido recientemente y he pulido bien es la de Electroforesis Vertical de Poliacrilamida. Esta técnica la uso en SDS-PAGE. El SDS-PAGE lo usaré junto con un Western Blot para identificar mi proteína cuando la logré expresar y asilar. Desde que empezé en agosto y escribí mi primer blog, he alcanzado como un 50% de las metas. No es fácil cuando se está en un lab de investigación y eres subgraduado. Además he tenido unos problemas en los procedimientos en los cuales estoy trabajando. Algunas de las dificultades en el camino han sido que no he obtenido los resultados esperados, muchos examenes que atrasan las horas en el lab. Bueno, hasta ahora estamos repitiendo algunos experimentos (SDS-PAGE) y estamos meditando y trabajando sobre otro metodo. Creo que empezaré todo desde el principio, pues trabajar con proteinas es bien delicado y tal vez he cometido un error y lo he traido al presente. Lo mas importante es tener fe, coraje y seguir luchando y leyendo mucho para alcanzar mis metas, que espero que antes de graduarme poder lograrlas. Les deseo mucho exito en sus proyectos. Aquí a la orden siempre. Bye!

August 26, 2008

Hola a Tod@S!

Espero que hayan pasado un lindo verano (los que descansaron) y los que realizaron research hayan aprendido mucho. Yo por mi parte pasé el verano en una biblioteca estudiando para el MCAT así que no pude continuar con mi investigación. Pero estoy de regreso al igual que ustedes para trabajar por lo que queremos…Nuestros Proyectos. Mucho ánimo y motivación compañeros que apenas estamos empezando nuestra carrera como científicos.

Este semestre agosto 2008 seguiré trabajando con mi investigación de FAP1. ¿Qué hay de nuevo?…bueno les contaré. En mayo pasado, luego de estar todo un semestre aprendiendo técnicas y leyendo literatura, realicé unos cuantos experimentos pero el resultado final no fue el esperado. Resumiendo, en el SDS-PAGE último no puede ver la banda de la proteína de interés, así que esto me lleva a tomar nuevas consideraciones.

Básicamente la propuesta que hicimos mi mentora (la Dra. Parés) y yo fue la siguiente. Repetiré el SDS-PAGE pero teñiré con Coomassie Blue. Este último intento me dejara saber si expreso la proteína. Otro aspecto a tomar será trabajar un poco más a nivel molecular. Trabajaré mas con mi vector haciendo unos ciertos cortes y modificaciones para ver cómo se comporta la expresión de mi gen. Obviamente no puedo abundar en detalles porque eso lo hago sentándome en la computadora horas y horas y no se sigue un protocolo en específico. Otra alternativa que me sugirió la profesora fue utilizar la cepa bacterial HT115. (si alguien en Biología tiene esa cepa por favor comuníquese conmigo). Esta bacteria me ayudaría más en la expresión de mi gen ya que expresara todo lo que esté bajo el promotor T7. Básicamente esto es lo que tenemos en mente hasta ahora. Luego que realice estos cambios, repetiré todos los experimento del semestre pasado, así que como ya tengo las destreza, espero avanzar más. Mi meta final es realizar un Western Blot y purificar mi proteína.

El trabajo este semestre se basa en lo mismo, mucha responsabilidad y esfuerzo. Actualmente tenemos nuevos compañeros en el lab, ya que solo somos 2 viejos, así que esto es bueno porque traemos nuevas mentes al lab y amistades. Además podemos ensenarle lo que sabemos fortaleciendo así nuestros conocimientos.

Como mencioné anteriormente realizaré las mismas técnicas pero con las modificaciones. La única técnica que por el momento hare diferente es el Western Blot. Ayer en la tarde hice mi primer SDS-PAGE y aprendí esa técnica que me hará falta luego.

Bueno amigos esto es un resumen formal de todas las ideas que tenemos pero a medida que pase el semestre iré posteando mas cositas. Pero si tienen dudas no duden en escribirme. Les deseo el mayor de los EXITOS a todos y espero que también salgan bien en sus clases. Estamos en comunicación. Cuídense y feliz semana.

Att. Luis

4th Blog Entry

April 26, 2008

Hola Compañeros!!!

Ya casi finalizando el semestre puedo resumier todo lo que he aprendido:

Tecnicas:

1- Transformación de Bacterias con Vectores
2- Preparación de Cultivo Bacterial Liquido
3- Extracción y purificación de DNA
4-  Electroforesis Horizontal
5- SDS-PAGE
6- Harvested Cells
7- Extracto bacterial
8-  Silver Staining of Polyacrylamide Gel
9- Tecnicas asepticas
10- Mini curso de Materiales Radioactivos
11- Preparacion de informes Orales y Escritos
12- Interpretación de Data
13- Buscar Articulos y Literatura Cientifica
14- Trabajo en grupo
15- BCA Assay 
16- Etc…

Algunas de las barreras que he tenido que enfrentar son: sacar tiempo para mi investigacion y aprender tecnicas dificiles. Pero con practica y paciencia las he logrado superar.  Ademas la busqueda y lectura de papers. 

El proximo semestre será bien interesante ya que espero aislar y caracterizar mi proteina para ver si cumplo mi meta final de cristalizarla y determinar su estructura. Espero que el proximo semestre sea igual o mejor que este con mas retos y experiencias!!!! Bueno compañeros sigan hacia adelante y si tienen preguntas ya saben que me pueden escribir.!! See ya!
 

Hola a tod@S!!

Desde el momento de mi llegada al laboratorio he aprendido mucho. Además aunque me cuesta adaptarme pero sigo muy motivado. Algo bien importante antes de hacer experimentos es leer la teoria y buscar en la literatura para entender el proceso y poder interpretar los resultados obtenidos.

Algunas de las técnicas que he aprendido gracias a mi mentora, la Dra. Parés son transformar bacterias. En mi caso usamos cepas BL-21 de E. coli, ya que todos sabemos que esta es la bacteria estudiada por excelencia. La transformanos a diario con plásmidos que tienen diferentes genes, pero casi siempre el propósito y aplicación es que si la bacteria crece, pues el plasmido fue insertado correctamente ya que se le añade un gen de resistencia a ampicilina, lo cual significa que el medio debe tener Amp. el beneficio de esta técnica es que es relativamente económica, rápida, segura, entre otras. Otra de las técnicas es correr una gel en electroforesis horizontal. Esta tecnica que todos conocemos nos permite separar muestras de DNA según a su tamaño. He aprendido mucho a preparar las geles, correrlas e interpretar los resultados, siendo esto lo mas importante, ya que se aplican los resulados a otros procesos o se detiene uno a ver si hay problemas. El beneficio de esta tecnica es que es bien poderosa y necesaria en laboratorios como el de nosotros y el de ustedes. Hacer Mini-preps es una técnica rapida que me permite aislar DNA para secuenciarlo, ponerlo en stock, correrlo en una gel, etc. Su beneficio es que es bien importante, ya que necesitamos aislar siempre DNA para todo. Aprendi a usar un poco el software pDRAW32. Este programa nos permite construir y analizar plasmidos a nuestra necesidad. En verdad que todavia me falta mucho por practicar, pero a la hora de hacer plasmidos es muy conveniente, ya que los plasmidos son los medio sen donde insertamos el gen fap1 que estamos estudiando para poder expresarlo y obtener la proteina FAP1 que es un homologo al factor de transcripcion humano NF-X1. Esta proteina se encuentra en la levadura. El gen fap1 le confiere resistencia a rapamicina a la levadura. (ver el articulo que postee). Otra tecnica fue hacer celulas electroquimicamente competente. Esto no es parte de mi investigacion pero es parte del trabajo diario del lab. Todos en mi lab usamos estas bacterias y pude aprender como se preparan. Es un proceso bien facil. Hasta ahora esas son las tecnicas que uso.

Para mi la experiencia mas gratificante es la de poder trabajar en equipo. Mi equipo de lab esta compuesto por estudiantes de BIOTEC, BIOL, MICRO, QUIM. Como ven somos bien diversos y ellos siempre me ayudan cuendo no entiendo algo, ya que llevan mas tiempo que yo en esto de la investigacion. Además son super amigables y entusiasmados con su trabajo. El semestre que viene los extrañare ya que muchos se graduan. Pero aprendi a como desenvolverme en trabajo en equipo y espero ayudar a otros estdiantes nuevos.

Bueno chik@S!!! sigan metiendole mano a su trabajo y estoy en la mayor disposición de ayudarlos si tienen dudas!! Hasta luego !

En verdad esta parte es bien interesante e importante que que todos queremos aprender y ser comentados. Los 3 blogs que visite me resultaron interesantes. Estos fueron militzalozada.wordpress.com, nina0489.wordpress.com y beba2489.wordpress.com

Son 3 temas bien curiosos y prometedores al campo de la ciencia y la medicina. Aprendi a leer lo que mis compañeros postean y a comentarlos como se merecen. Ademas aprendi sobre sus técnicas y aplicaciones, lo cual también me enriquece a mi como estudiante y cientifico. Además visite los Blogs de 2 estudiantes que no son del RUM y también poseen trabajos fascinantes y me llaman la atencion ver como se trabaja en otros recintos. Bueno mas adelante seguiré visitando blosgs. Espero verlos todos! Hasta luego compañeros. y EXITO 100pre!!!!